39 éme CONGRES ANNUEL du GFHGNP : DIJON 2018

Rôle modulateur des lipides polaires laitiers

dans l’inflammation intestinale

M. Ruiz, A. Penhoat, P. Poinsot, J. Fournier, M. Milard,

M. Lecomte, A. Durand, C. Buisson, E. Meunier, A.

Lachaux, MC. Michalski, N. Peretti.

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Liens d’intérêt

 Aucun

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Equipe 4 : Lipides Postprandiaux et Lipoprotéines riches en Triglycérides:

Régulations et Impacts Fonctionnels (LiPo)

A. Penhoat, MC. Michalski, N. Peretti

RPR2A

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Rôle modulateur de l’alimentation dans les MICI :

=> Nutrition entérale exclusive

- 1

ère

ligne de traitement chez l’enfant pour induire une rémission

- Rôle spécifique de chaque nutriment pas clairement établi

Contexte

Bourlieu and Michalski, Curr

Opin Clin Nutr, 2015

Ruemmele et al, Consensus guidelines of

ECCO/ESPGHAN, J Crohns Colitis, 2014

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• Lipides polaires laitiers (MPL) :

- renforcent la barrière intestinale

- diminuent l’expression de gènes régulateurs de l’inflammation de bas

grade au niveau du tissu adipeux

- modulent le nombre de cellules à mucus dans le colon

Contexte

Benoit et al, Nutr Res, 2015

Lecomte et al, Mol Nutr Food Res, 2016

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Hypothèse :

Dans un contexte de MICI, les MPL pourraient :

 Diminuer l’inflammation intestinale et systémique

 En diminuant la sécrétion entérocytaire de cytokines inflammatoires

 En diminuant la perméabilité intestinale

 Augmenter l’absorption des lipides

 Lutte contre la dénutrition

=> Traitement des MICI

Contexte

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• Modèle cellulaire :

Caco-2/TC7, cultivées sur filtre

• Induction d’une inflammation :

LPS seul en apical (1 µg/mL)

Mélange de cytokines en basolatéral :

TNFα (50 ng/mL), IFNγ (50 ng/mL), IL-1β (25 ng/mL), LPS (1 µg/mL)

Van de Walle et al, Toxicol in vitro, 2010

• Incubation avec un modèle de micelles mixtes lipidiques, +/- enrichies en

sphingomyéline laitière (SM)

Matériels & Méthodes

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Matériels & Méthodes

• Objectif principal :

1) Modulation de l’inflammation

IL-6, IL-8, TNFα (Elisa)

Expression gènes de l’inflammation (RTqPCR)

• Objectifs secondaires :

2) Perméabilité intestinale :

TEER, Lucifer Yellow, gènes

3) Sécrétion intestinale lipidique :

Niveau de sécrétion des TG (PicoProbe),

Expression gènes de transport des lipides (RTqPCR)

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Résultats

1) Inflammation : Sécrétion de cytokines

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Résultats

1) Inflammation : Régulation des gènes

Pas de modification de l’expression de

Cox2, TNFalpha, TLR4

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Résultats

2) Perméabilité :

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Résultats

2) Perméabilité : Régulation des gènes

TJP1 non significatif

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Résultats

3) Sécrétion des triglycérides :

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Résultats

3) Sécrétion des triglycérides : Régulation des gènes

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Conclusion

Sur un modèle in vitro monocellulaire d’inflammation intestinale aiguë, la

sphingomyéline laitière :

• Ne diminue pas l’inflammation

=> sécrétion IL-6 et IL-8 en apical : rôle trophique, défense ?

• Semble augmenter la perméabilité intestinale

=> mais augmentation de l’expression des protéines de jonction :

= réponse adaptative ?

• Augmente la sécrétion de TG en réponse à un stimulus inflammatoire

=> désordres lipidiques

=> gènes ( ↓ MTP, ↑ Sar1b)

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Conclusion

Perspectives :

• Rôle des autres MPL ou du lait sur les cellules intestinales

• Rôle de la SM sur le mucus intestinal (co-culture)

• Rôle sur modèle d’inflammation chronique / à bas bruit

• Etude du métabolisme lipidique lors d’un stress inflammatoire

• Etudes in vivo

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Merci de votre attention

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Adapté de Dash et al,

Annu Rev Nutr, 2015